Curso Confocal
Programa Para o Curso de Microscopia Confocal Básica - 2019
Responsável: Renato A. Mortara (ramortara@unifesp.br)
Abril, 3as e 6as pela manhã, no 6o andar do Edifício de Ciências Biomédicas
6 vagas
** As aulas teóricas terão duração de aproximadamente 1,5h e em seguida serão realizadas as demonstrações práticas no
Microscópio Confocal do ECB-UNIFESP (Leica SP-5 Tandem Scanner)
A Bibliografia Básica é baseada em conteúdo da Internet:
http://micro.magnet.fsu.edu/primer/index.html: este é O site.
Outros sites de interesse:
http://www.cyto.purdue.edu/class/bms524/index.htm
Para as duas primeiras Aulas teóricas:
Vamos começar o CURSO com noções básicas de óptica e microscopia.
Para tanto, TRAZER PREPARADO (como achar melhor...)
ANTES DAS AULAS, o seguinte conteúdo encontrado nos seguintes links:
Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Radiação eletromagnética: freqüência, l, reflexão, refração, difração, polarização, interferência, birefringência, temperatura da cor, cores primárias, filtros, visão e percepção de cor, introdução às lentes.
Demonstrações animadas no site
Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Difração, interferência, radiação eletromagnética, diagrama de Jablonski, excitação e emissão eletrônica, interferência, bi-refringência, ângulo de Brewster, lente de aumento, ação das lentes, espelhos côncavos e convexos, reflexão, refração, refração prismática, visão, cores primárias, separação de cores e filtros, temperatura de cor, laseres.
Microscopia óptica básica
Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Conceitos de aumento (magnificação, objetivas: especificações e identificação, abertura numérica (N.A.) e resolução, aberrações e curvaturas, meio de imersão, imagem intermediária no microscópio, oculares, condensadores, fontes de luz, platinas.
Dar uma BOA olhada nas demonstrações animadas no site: http://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/anatomyjava.html
Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Aumento/magnificação, microscopia de luz transmitida, correção p/ lamínula, abertura numérica, curvatura de campo, composição de um microscópio, discos de Airy/ N.A./ Resolução, N.A. do condensador, diafragma do condensador, cone de luz do condensador, diafragma de campo, óleo de imersão, distância focal das objetivas, alinhamento das lâmpadas, laseres.
Neste site, quero que vocês abram p/ discutirmos as seguintes sub-páginas:
1) Magnification e java de distância focal
2) Objetivas
http://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/numaperture.html
Inclusive com as animações:
d) Óleo de Imersão
3) Formação de Imagens e ver os Javas sobre Interefrência e Airy disks
4) Aberrações ópticas das objetivas
5) Meios de Imersão e Índices de refração
6) Oculares
7) Condensadores e os seguintes javas:
a) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/condenseraperture/index.html
b) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/contrast/index.html
c) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/lightcones/index.html
9) Alinhamento p/ Köhler:
a) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/kohler/index.html
b) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/filament/index.html
c) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/diaphragm/index.html
d) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/transmitted/index.html
Demonstrações
Devido ao número de alunos e o espaço na sala do confocal, as demonstrações práticas serão limitadas:
Aquisição de Imagens
Ajuste da Iluminação de luz transmitida em DIC Köhler
Epifluorescência no Microscópio
Objetivas e definição
XY scan, direto x averaging, box size, z control
Métodos de análise
Z series and time series
Y section
Transmission detector
Reflection imaging
Séries Z de mentirinha
Séries Z de verdade
Material Vivo
Preparação de amostras, Células e tecidos, Técnicas de imunomarcação e marcação direta (Wishful thinking ??!!)