Curso Confocal

Programa Para o Curso de Microscopia Confocal Básica - 2019

Responsável: Renato A. Mortara (ramortara@unifesp.br) 

Abril, 3as e 6as pela manhã, no 6o andar do Edifício de Ciências Biomédicas

6 vagas

** As aulas teóricas terão duração de aproximadamente 1,5h e em seguida serão realizadas as demonstrações práticas no

Microscópio Confocal do ECB-UNIFESP (Leica SP-5 Tandem Scanner)

A Bibliografia Básica é baseada em conteúdo da Internet:

http://micro.magnet.fsu.edu/primer/index.html: este é O site.

Outros sites de interesse:

http://www.loci.wisc.edu

http://www.cyto.purdue.edu/class/bms524/index.htm 


Para as duas primeiras Aulas teóricas:

Vamos começar o CURSO com noções básicas de óptica e microscopia.

Para tanto, TRAZER PREPARADO (como achar melhor...)

ANTES DAS AULAS, o seguinte conteúdo encontrado nos seguintes links:

Luz e Cor

Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Radiação eletromagnética: freqüência, l, reflexão, refração, difração, polarização, interferência, birefringência, temperatura da cor, cores primárias, filtros, visão e percepção de cor, introdução às lentes.

Demonstrações animadas no site
Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Difração, interferência, radiação eletromagnética, diagrama de Jablonski, excitação e emissão eletrônica, interferência, bi-refringência, ângulo de Brewster, lente de aumento, ação das lentes, espelhos côncavos e convexos, reflexão, refração, refração prismática, visão, cores primárias, separação de cores e filtros, temperatura de cor, laseres.

Microscopia óptica básica
Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Conceitos de aumento (magnificação, objetivas: especificações e identificação, abertura numérica (N.A.) e resolução, aberrações e curvaturas, meio de imersão, imagem intermediária no microscópio, oculares, condensadores, fontes de luz, platinas.

Dar uma BOA olhada nas demonstrações animadas no site: http://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/anatomyjava.html

Nesta página, vocês vão abrir os seguintes links: Aumento/magnificação, microscopia de luz transmitida, correção p/ lamínula, abertura numérica, curvatura de campo, composição de um microscópio, discos de Airy/ N.A./ Resolução, N.A. do condensador, diafragma do condensador, cone de luz do condensador, diafragma de campo, óleo de imersão, distância focal das objetivas, alinhamento das lâmpadas, laseres.

Neste site, quero que vocês abram p/ discutirmos as seguintes sub-páginas:

1) Magnification e java de distância focal

2) Objetivas

http://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/numaperture.html

Inclusive com as animações:

a) Abertura Numérica

b) Correção de Curvatura 

c) Correção p/ Lamínula

d) Óleo de Imersão

3) Formação de Imagens e ver os Javas sobre Interefrência e Airy disks

4) Aberrações ópticas das objetivas 

5) Meios de Imersão e Índices de refração 

6) Oculares

7) Condensadores  e os seguintes javas:

a) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/condenseraperture/index.html

b) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/contrast/index.html

c) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/lightcones/index.html

8) Fontes de Luz 

9) Alinhamento p/ Köhler:

a) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/kohler/index.html

b) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/filament/index.html

c) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/diaphragm/index.html

d) http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/microscopy/transmitted/index.html

 

Demonstrações

Devido ao número de alunos e o espaço na sala do confocal, as demonstrações práticas serão limitadas:

Aquisição de Imagens

Ajuste da Iluminação de luz transmitida em DIC Köhler

Epifluorescência no Microscópio

Objetivas e definição

XY scan, direto x averaging, box size, z control

Métodos de análise

Z series and time series

Y section

Transmission detector

Reflection imaging

Séries Z de mentirinha

Séries Z de verdade

Material Vivo 

Preparação de amostras, Células e tecidos, Técnicas de imunomarcação e marcação direta (Wishful thinking ??!!)